進口胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
進口胎牛血清質(zhì)量檢定指標:
1、進口胎牛血清內(nèi)毒素檢測:凝膠法和動態(tài)濁度法 要求內(nèi)毒素含量≤10EU/ml。
2、化學檢定:包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白 (≤0.02%)。
3、進口胎牛血清微生物檢查:細菌和真菌——直接培養(yǎng)法、噬菌體——噬斑法和增殖法 支原體——培養(yǎng)法和DNA染色法 、牛病毒——細胞培養(yǎng)法。要求均為陰性。
4、促細胞生長測定:(SP2/0-Ag14標準規(guī)定)
a.大增殖濃度≥1.0×106個/ml、倍增時間≤20小時 克隆率=(陽性孔平均數(shù)/培養(yǎng)孔總數(shù))×100%。
b.貼壁效率( VERO細胞、二倍體細胞等);10%血清――50或100個細胞/孔。
c.貼壁效率(%)=(每孔克隆平均數(shù)/每孔存活的培養(yǎng)細胞平均數(shù))×100 相對貼壁效率=被測血清貼壁效率/參考血清貼壁效。
如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。
我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
進口胎牛血清其功效與作用有以下幾點:
1、提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物;
2、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調(diào)變它們所結合的物質(zhì)活力;
3、有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用;
4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源;
5、起酸堿度緩沖液作用;
6、提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。