細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同,英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時,傾向性地稱為培養(yǎng)基,而將粉劑配成液體后,多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常常補加血清、抗生素等成分。培養(yǎng)基主要包括天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無血清細(xì)胞培養(yǎng)基等。
細(xì)胞培養(yǎng)基組成及作用
組成及作用:
氨基酸
組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類的細(xì)胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。
必需氨基酸包括L-谷氨酰胺、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-纈氨酸等。
維生素
維持細(xì)胞生長的生物活性物質(zhì),在細(xì)胞代謝中起調(diào)節(jié)及控制作用。在細(xì)胞培養(yǎng)中,盡管血清是維生素重要來源,但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長。
脂溶性維生素如:A、D、E、K。
水溶性維生素如:B1、B2、B6、B12、泛酸、葉酸、生物素、C、煙酰胺等。
許多維生素參與構(gòu)成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進(jìn)行。
VA是細(xì)胞合成糖蛋白時寡糖基的載體,對上皮細(xì)胞有重要的維護作用。VD參與調(diào)節(jié)鈣的吸收。VE是抗氧劑,可防止組成生物膜的磷脂中不飽和脂肪酸被氧化。VK缺乏會引起低凝血酶原及凝血時間延長。
葉酸是合成四氫葉酸的重要原料,四氫葉酸在核酸的生物合成和蛋白質(zhì)的生物合成過程中起重要作用。
生物素是一些特異羧化酶的組成部分,參與糖代謝和脂肪酸的合成過程。
碳水化合物
碳水化合物是細(xì)胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。
無機離子
鈉、鉀、鎂、鈣、磷等基本的無機離子,這些都是細(xì)胞組成所必須并參與細(xì)胞的代謝。
培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素, 細(xì)胞通??赡褪?60mOsm/kg ?320 mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì)。
Na+是細(xì)胞外液中最主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液,細(xì)胞內(nèi)K +的對于激活某些酶是必需的,它在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡也有極重要意義。Ca2+ 在細(xì)胞外液中的作用是將組織內(nèi)部細(xì)胞之間相互粘著,在細(xì)胞內(nèi)參與許多重要的細(xì)胞生理活動,如傳導(dǎo)、參與肌肉細(xì)胞收縮等。Mg2+ 是構(gòu)成細(xì)胞間質(zhì)的重要成分,對于細(xì)胞間相互穩(wěn)定結(jié)合有很重要的意義。磷的化合物對細(xì)胞物質(zhì)代謝和生理功能調(diào)控的功用是十分廣泛而*。