細胞凍存液一款無血清、無需程序降溫的細胞凍存液,適用于多種哺乳動物細胞和間充質(zhì)干細胞的凍存。該款凍存液所有成分均為原料藥級別,生產(chǎn)過程遵循ISO9001體系,嚴格執(zhí)行cGMP操作標準,符合細胞治療標準。
細胞凍存液氮罐的具體操作步驟和細胞復蘇流程:
大量細胞如何儲存在液氮罐里,液氮罐里一般灌有低溫液氮,細胞的儲存需要低溫環(huán)境,放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環(huán)境。細胞凍存液氮罐是將細胞存入液氮罐的液相里儲存,有的方形抽屜式提籃,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,*浸入。使細胞*處于液氮-196度環(huán)境下,才能夠長期保存細胞。
細胞凍存液氮罐的具體操作步驟:
1、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細胞按常規(guī)方法消化,或分離獲得原代細胞后,收集于離心管中。
2、使用離心機離心,去除上清,收集細胞沉淀。
3、根據(jù)細胞生長密度加入適量的LiveCyteTM細胞凍存液進行重懸,充分混勻。
4、將細胞懸液分裝至凍存管中,直接放置于-80°C冰箱保存。24小時后可移入液氮長期保存(可選)。
細胞凍存液氮罐的細胞復蘇流程:
1、從-80°C冰箱或液氮罐中取出細胞。
2、迅速放入37°C水浴,并不時搖動,在3分鐘之內(nèi)使其*融化。
3、在凍存管中加入少量*培養(yǎng)基,再將細胞混合液移入含有該細胞*培養(yǎng)基的離心管中,樣品和培養(yǎng)基比例為1:10,然后輕輕吹打,混合均勻。
4、離心后去除上清,收集細胞沉淀。
5、輕輕彈松細胞沉淀,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,輕輕晃動使細胞分布均勻,置于37℃孵箱中培養(yǎng)。