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心肌細胞培養(yǎng)基的廣泛應用
更新時間:2015-10-19 點擊次數(shù):1200
心肌細胞,是目前和將來*的人源心肌細胞來源。
由于人類心臟的生化和分子生物學特性,其心肌細胞的很多核心功能蛋白與小鼠等模式動物不同。例如,小鼠心肌細胞主要表達α重鏈肌球蛋白,以適應高頻率的搏動,而人類心肌細胞主要表達β重鏈肌球蛋白,適應低頻率的搏動。此外,以Ito 和Ik為代表的鉀離子通道在不同種屬動物及人類心肌細胞間的表達和功能差異極大,對于動作電位形成的貢獻也各不相同。
傳統(tǒng)研究采用的心肌細胞, 主要是采用從新生或成年動物心臟分離獲得的原代心肌細胞。同時,此類細胞還存在: 分離技術復雜繁瑣、缺少有效的純化方法、體外培養(yǎng)困難等缺陷。尤其是對于心臟生理接近人類的大型哺乳動物而言,分離原代心肌細胞的動物成本極其高昂,而獲取的心肌細胞活性也更低。因此,ES/hiPS心肌細胞是此類研究的的選擇由于傳統(tǒng)原代心肌細胞在培養(yǎng)中存活時間極短(成年動物僅有數(shù)小時,新生動物不超過1周),絕大多數(shù)耗時較長的心臟生理和病理學研究難以采用心肌細胞開展,不得不選擇復雜且成本較高的動物模型,甚至無法開展。而ES/hiPS-心肌細胞的解決了這一問題。
心肌細胞在開發(fā)方面的主要應用:
作為一種標準化的人源細胞產(chǎn)品,心肌細胞可以極大的促進研發(fā)、提果評價和毒性測試。從而在占絕大多數(shù)的療效低下和具有潛在毒性的化合物進入成本高昂的階段前,將它們排除出去。如果采用了心肌細胞進行測試,不僅能夠排除具有心臟毒性的化合物,還能初步評價心血管類的療效,極大的降低開發(fā)成本,并且提率。
心肌細胞培養(yǎng)基是專門為正常人類心肌細胞體外培養(yǎng)設計的zui適于其生長的培養(yǎng)基。經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、生長因子、微量礦物質和低濃度胎牛血清(5%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進正常人類微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長,并為其達到營養(yǎng)平衡狀態(tài)提供數(shù)量上和質量上的保證。