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純化磁性微珠 現(xiàn)貨
產(chǎn)品名稱(chēng):CleanNGS-R-5 ml 貨號(hào):CNGS-R-0005
產(chǎn)品純化流程:
1.NGS文庫(kù)或PCR產(chǎn)物體系中加入CleanNGS磁珠,核酸片段將結(jié)合到磁珠上。
2.在磁力架上吸附磁珠,移除上清。
3.加入70%乙醇洗滌磁珠兩遍。
4.加入ddH2O或TE洗脫DNA,在磁力架上吸附磁珠,上清即為PCR純化產(chǎn)物。
片段篩選流程:
1.向溶液中加入上一輪分選CleanNGS磁珠,渦旋混勻或用移液槍吸打混勻。
2.將體系置于磁力架.上,吸附磁珠。
3.待溶液澄清后,轉(zhuǎn)移.上清至干凈的離心管中。
4.向溶液中加入第二輪分選CleanNGS磁珠,渦旋混勻或用移液槍吸打混勻。
5.在磁力架上吸附磁珠,移除. 上清。
6.加入80%的乙醇洗滌兩次。
7.加入ddH20溶解DNA,在磁力架上吸附磁珠,上清即為片段篩選產(chǎn)物。
CleanNGS vs AMPureXP
所有樣本一致
采用Aglient TapeStation 2200進(jìn)行濃度和片段大小分析
- 1.8x 磁珠純化:
純化回收所有范圍的片段大小
一1.0x bead purification:
去除引物和小片段擴(kuò)增產(chǎn)物
0.65x - 0.25x bead purification:Size selection
雙端選擇,去除大片段也去除小片段
總RNA純化-CleanNGS
總RNA濃度為500 ng/μL和50ng/μL的樣本,樣本量均為10ul,按照說(shuō)明書(shū)推薦的protocol平
行測(cè)定3次。純化后20ul洗脫,采Agilent's TapeStation 2200測(cè)定,結(jié)果如圖??俁NA的回收率為86-94%。
PCR產(chǎn)物純化( CleanNGS/ CleanNGS-R vs AMPureXP )
純化磁性微珠 現(xiàn)貨
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